PCR儀的技術(shù)發(fā)展同時(shí),新的擴(kuò)增技術(shù)也不斷誕生。有的可結(jié)合應(yīng)用,共同構(gòu)成了核酸體外擴(kuò)增技術(shù)。
1、聚合酶鏈反應(yīng)的發(fā)明。
聚合酶鏈反應(yīng)使人們夢(mèng)寐以求的體外無(wú)限擴(kuò)增核酸片段的愿望成為現(xiàn)實(shí)。其原理類(lèi)似于DNA的體內(nèi)復(fù)制,只是在試管中給DNA的體外合成提供一種合適條件。由于該酶不耐熱,加熱變性DNA后都要重新補(bǔ)加Klenow酶。耐熱DNA聚合酶的應(yīng)用使得PCR儀反應(yīng)更易于自動(dòng)化,推出了*臺(tái)PCR熱循環(huán)儀,使產(chǎn)品技術(shù)的自動(dòng)化成為現(xiàn)實(shí)。
2、核酸體外擴(kuò)增的設(shè)想。
用DNA聚合酶延伸引物,并不斷重視的過(guò)程便可克隆RNA基因。但由于當(dāng)時(shí)很難進(jìn)行測(cè)序和合成寡核苷酸引物,DNA限制性內(nèi)切酶,使體外克隆基因成為可能,使Khorana等的早期設(shè)想被人們遺忘。
3、聚合酶鏈反應(yīng)的技術(shù)。
PCR儀的應(yīng)用與技術(shù)本身的優(yōu)化問(wèn)題和人類(lèi)基因組計(jì)劃與PCR儀的進(jìn)展。體現(xiàn)了生物學(xué)家對(duì)PCR儀的重視。產(chǎn)品是采用先進(jìn)梯度技術(shù),擴(kuò)增結(jié)果、穩(wěn)定;程序設(shè)置簡(jiǎn)便,外表簡(jiǎn)潔美觀??筛鶕?jù)程序設(shè)定恒溫模塊使得結(jié)果一致,也可根據(jù)水平梯度設(shè)置優(yōu)化實(shí)驗(yàn)方案;程序步驟通過(guò)超大液晶屏和圖表表示,直觀、簡(jiǎn)便,適用于多種程序改變。當(dāng)使用不同高度的PCR儀管或板時(shí),為達(dá)到*實(shí)驗(yàn)結(jié)果,熱蓋可設(shè)置成保持不同的溫度,其滑行設(shè)計(jì)方便了使用者放置樣品,并避免燙傷。